各有关口岸动植物检疫局：

最近，根据有关渠道获得的信息，今年3月初美国亚利桑那州（Arizona）发生了小麦印度腥黑穗病（TilletiaindicaMitra，以下简称TIM），带菌种子有可能已流散到了新墨西哥州（NewMexico）。目前国家局正进一步了解此疫情的具体情况，并和美国动植物检疫局磋商植物检疫证书等问题，要求美方要严格按照中方的检疫要求进行检疫，并在签发的植物检疫证书上声明出口的小麦产自TIM非疫区。

TIM是严重危害小麦生产的世界性检疫病害，包括中国在内的20多个国家对此病有严格的检疫要求。为防止此病害随进口粮食传入，我国禁止TIM疫区的小麦进口，请各有关口岸局要加强对此病的检疫，特别是要加强对来自美国小麦的检疫，严防此病害传入。为便于工作，随文下发了“小麦印度腥黑穗病菌检疫鉴定方法（试行）”，请照此方法进行检疫，发现问题，及时和国家局联系。

附件：小麦印度腥黑穗病菌检疫鉴定方法（试行）

动植物检疫局

一九九六年三月二十日

附件：小麦印度腥黑穗病菌

（TilletiaindicaMitra）检疫鉴定方法（试行）

一、扦取复合样品：

每船分层次，按品种、等级在各舱扦取复合样品，一般应每1000吨扦取1份复合样品。

（1）上层（第一次）检疫：必须在卸货前进行，应根据有关规定或具体情况，在锚地或进港停泊后实施检疫。

（2）卸货期间检疫：通常根据卸货进度分层取样，每舱不得少于3次。

（3）现场检查：分别在各舱各层次按棋盘式随机选点20～30个，每点至少取1000克小麦，用1.7×20mm长孔筛或2.5mm圆孔筛进行筛检，用肉眼或手持放大镜仔细检查筛下物中有无菌瘿或病粒，并同时检查筛上物，根据需要将筛上挑出物或筛下物装入盛器，带回实验室做进一步检查。

（4）扦取复合样品：现场检查时，用取样铲分舱分层次棋盘式选点20～30个抽取复合样品，总重量不少于1500克，带回实验室检查。必要时取样点可增至90个。

二、制取平均样品：

将复合样品充分混匀，制成平均样品，从中称取50克做洗涤检查。

三、症状检查：

将平均样品倒入灭菌白瓷盘内，仔细检查有无菌瘿和病粒，重点检查小麦种子腹沟两侧有无变色或异常。轻度感病的种子表皮上有微小的隆起疱斑，将种子置于皿内，在冷水中浸泡1小时，疱斑更为明显，再用针刺破常可见黑粉涌出。亦可将种子用0.2％NaOH溶液浸泡一昼夜，则种子病部呈黑色，而健部呈黄色，区别明显。感病较重的籽粒腹沟侧面表皮下形成黑粉腔，有时延至部分或大部分胚乳，表皮破裂后，露出黑粉。挑取黑粉进行显微镜检查鉴定。

四、洗涤检查：

将称取的50克平均样品倒入灭菌三角瓶内，加灭菌水100毫升，再加表面活性剂（吐温20或其他）1～2滴，加塞后振荡5分钟，立即将悬浮液倒入10～15毫升灭菌离心管中，以每分钟1500转离心3分钟，完全倾去上清液，重新离心，将所有洗涤悬浮液离心完毕，在沉淀物中加入席尔氏溶液。视沉淀物多少，定容到1或2毫升，每份样品至少在显微镜下检查5个盖玻片，每片全部检查。

如发现可疑小麦印度腥黑穗病菌冬孢子，应以××个成熟的冬孢子为判定结果的依据，不足××个孢子时增加玻片检查数量，直至所有沉淀悬浮液用毕（具体的孢子数目尚需做进一步的统计分析后定）。

五、病原菌鉴定方法：

在1000倍（油镜）下检查成熟冬孢子，进行病原菌形态鉴定和测量。目镜测微尺要精确核校。

冬孢子球形至近球形，其中一些有尾丝（菌丝残体），暗褐色至黑色，直径24～47μm（平均35.5μm），外孢壁具疣状突起物，向周围形成翼状外缘，不孕细胞通常泪珠状，淡黄褐色。

小麦印度腥黑穗病菌的冬孢子直径大，颜色深，外孢壁饰纹为疣状突起，与小麦上的多种具网状结构（网眼）的黑粉菌区别明显。

进行形态学鉴定时，应同时注意小麦印腥病菌与其近似种的区别。稻腥黑粉菌（T.barclayana）是小麦印腥病菌的最主要近似种，可从孢子大小，不孕细胞形状，外胞壁边缘饰纹等不同来区别。由于稻腥病菌除稻属外，尚有黍属及狼尾草属为其主要寄主，为此应注意检查进口粮中的有关禾草寄主种子。